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HPLC系統(tǒng)的酸清洗和鈍化

更新時間:2015-01-08瀏覽:1834次

30%磷酸水溶液通過酸反應(yīng)和強表面活性劑/洗滌劑的共同作用,可以有效地清潔不銹鋼及其它潤濕的部件。這一方法比更常用的硝酸“鈍化”更有效、且較少損害(特別是對日常使用低紫外波長的應(yīng)用來說)。這一磷酸清洗步驟不是起鈍化作用,但它是系統(tǒng)鈍化前清洗的*步。一般來說,對于陽離子的離子色譜分析或配有氧化方式的電化學(xué)檢測器以外的應(yīng)用不需要鈍化系統(tǒng)。因為有真空脫氣機(每個通道體積為8m1),可不*磷酸;中洗全部通道。如果你計劃四個通道都要用,則可用濕灌注的方式以4mL/min流速對每個通道清洗8~1 O分鐘來清洗脫氣機。這一步完成后你必須*淋洗管路,用水淋洗2~3次以便將磷酸從溶劑過濾頭等部件沖洗凈。
安裝好的液相色譜系統(tǒng)的酸清洗和鈍化
液相色譜系統(tǒng)內(nèi)部可能的污染物來自人的觸摸,暴露在實驗室化學(xué)環(huán)境,與零部件制造相關(guān)的殘留物,或來自先前的流動相和樣品的殘余物。
雖然系統(tǒng)自身也會逐步地被流動相清洗,但某些釋放出的雜質(zhì)會吸附在色譜柱上以及檢測器潤濕的表面上,因而會降低總的性能。
•磷酸清洗:
通常用于從系統(tǒng)中除去有機雜質(zhì)??赡苁怯捎谙礈熳饔茫坪醣葟娪袡C溶劑更好也更快。這一步清洗必須在硝酸鈍化之前完成。
•硝酸鈍化:
實際上是作用于不銹鋼表面,在表面上生成均勻的氧化層。這層氧化膜保護不銹鋼免受腐蝕(鹵化物,螯合劑,等等)并且盡量減少浸出的金屬離子進入流動相。
以下應(yīng)用需要在使用前做磷酸清洗和硝酸鈍化,包括:
•所有的氨基酸分析系統(tǒng)
•所有包含電化學(xué)檢測器的系統(tǒng)
•所有要分析無機陽離子,包括過渡金屬的系統(tǒng)
•所有利用柱后添加衍生試劑或絡(luò)合樣品組分的系統(tǒng)
以下應(yīng)用需要在使用前只做磷酸清洗,包括:
•所有常規(guī)用途的、可能在低pH環(huán)境下在低紫外檢測波長下運行的HPLC系統(tǒng)
•所有需要高靈敏度性能的梯度紫外檢測系統(tǒng)
系統(tǒng)清洗指南:
注意:在實行這個程序時采用適當?shù)陌踩雷o措施
準備工作:
首先,摘下色譜柱,用兩通或接頭取代色譜柱。在實行這一清洗步驟時,如果有可能選擇監(jiān)測的紫外波長為:254nm。通過軟件或移去電纜的方式取消紫外檢測器的自動回零功能。
具體步驟:
1、用甲醇*沖洗系統(tǒng),以等比例方式通過泵的所有管路。
2、用水*沖洗系統(tǒng),以等比例方式通過泵的所有管路。
3、以等比例方式通過泵的所有管路導(dǎo)入~30%v/v磷酸水溶液。以1mL/min流速洗大約一個小時。在沖洗期間活動所有的閥,包括:參比閥、進樣閥及旁路閥等等。
4.用水*沖洗所有管路和系統(tǒng)。
必要時用6N硝酸(HN03)重復(fù)以上步驟。否則,跳到第7步。注意:硝酸是一個強紫外吸收溶液。除非需要,不要做鈍化程序
5.以等比例方式通過泵的所有管路導(dǎo)人6N硝酸水溶液(大約是40%)。以1mL/min流速洗大約一個小時。
6.用水*沖洗系統(tǒng),仔細檢查是否有任何滲漏,在沖洗期間反復(fù)活動所有的閥,包括:參比閥、進樣閥及旁路閥等等。
注意:如果你要用低于270nm的紫外波長作檢測,則需要更大量水的清洗過程,不斷的換新鮮水并活動各個閥(沖洗進樣器,等)以便從系統(tǒng)中除去所有的痕量硝酸根離子。硝酸清洗后經(jīng)常在幾天之內(nèi)都會觀察到在低紫外波長下有負的基線漂移。勤換水和有耐心是盡快消除紫外本底的關(guān)鍵。
7.返回到甲醇洗,然后繼續(xù)用實驗所需的溶劑沖洗。
8.通過軟件或接上電纜的方式重新使紫外檢測器的自動回零功能恢復(fù)。

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