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HPLC測(cè)定沒(méi)食子中沒(méi)食子酸的含量

更新時(shí)間:2015-01-08瀏覽:2269次

摘要:目的建立沒(méi)食子中沒(méi)食子酸的含量測(cè)定方法。方法采用液相色譜法測(cè)定沒(méi)食子酸的含量,色譜柱為Waters Symme @Cl8柱(5μm,4.6 mm×150mm);流動(dòng)相為甲醇一0.05%磷酸溶液(5:95);流速0.8 ml·min ;檢測(cè)波長(zhǎng)273 Bill。結(jié)果沒(méi)食子酸進(jìn)樣量在0.0506~0.4060μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,平均加樣回收率為98.99%,RSD:1.5%。結(jié)論所用方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確。
關(guān)鍵詞:沒(méi)食子;沒(méi)食子酸;HPLC
中圖分類(lèi)號(hào):R917 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1006—0103(2005)01—0071—02
Determination of gallic acid in Turkish gaUs by HPLC
REN Yuan,DU Nian—sheng(Pharmacy College ofXinjiang Medical University,Urmnqi 830054,Ch/na)

Abstract:OBJECTIVE To establish a determination method of gallic acid in Turkish galls.METHODS An HPLC method was used .The column was packed with Waters Symmetry@Ci8(5μm,4.6mm×150 mm).The phase was methanol一0. 05% ph0sphoric acid(5:95).The flow rate was 0.8 ml/min.The detective wavelength was at 273 nln.RESULTS The calibration curves were linear within 0.O506—0.4O6Oμg.Th e recovery Was 98.99% with兄 of 1.5% .CONCLUSION Th is method is simple,rapid and accurate.
Key words:Turkish Galls;Gallic acid;HPLC

    沒(méi)食子是由沒(méi)食子蜂的幼蟲(chóng)寄生于沒(méi)食子樹(shù)幼枝上所產(chǎn)成的蟲(chóng)癭。沒(méi)食子中含有鞣質(zhì)和沒(méi)食子酸,為維吾爾醫(yī)生常用藥,具有收斂、抗炎、促進(jìn)黏膜愈合的作用?,F(xiàn)參照文獻(xiàn)|J 采用HPLC測(cè)定沒(méi)食子中沒(méi)食子酸的含量。
1 實(shí)驗(yàn)部分
1.1 儀器與試藥:液相色譜儀包括Waters Delta 6OO泵,waters 2996 PDA檢測(cè)器(美國(guó)Waters公司)。沒(méi)食子藥材(新疆維吾爾自治區(qū)藥品檢驗(yàn)所鑒定);沒(méi)食子酸對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào):0831—9501);甲醇(色譜純);磷酸(分析純);水為重蒸水。
1.2 色譜條件
    色譜柱為Waters SymmetryCl8(5μm,4.6mm×150 mm);流動(dòng)相為甲醇一0.05%磷酸溶液(5:95);檢測(cè)波長(zhǎng)273nm;流速0.8 ml/min ;柱溫25℃。
1.3 方法與結(jié)果
1.3.1 溶液的制備:精密稱取沒(méi)食子粗粉1 g,置50 m1量瓶中,加甲醇30 m1,超聲提取1 h,加甲醇至刻度,搖勻,濾過(guò),精密吸取續(xù)濾液l m1,甲醇定容至l0 m1量瓶中,搖勻,作為供試品溶液。精密稱取干燥至恒重的沒(méi)食子酸對(duì)照品2.55mg,置50 m1量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,得對(duì)照品溶液。
1.3.2 線性范圍的考察:精密吸取沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 ml于5個(gè)l0 m1量瓶中,分別加甲醇至刻度,搖勻,各吸取l0 l注入液相色譜儀,以進(jìn)樣量( g)為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸,得線性方程為:A=1.468×lO6C-1. 739×lO4(r=0.9997)。結(jié)果表明,沒(méi)食子酸在0.0506 0.4O60/_tg范圍內(nèi),具有良好的線性關(guān)系。
1.3.3 精密度試驗(yàn):在“1.2.1”項(xiàng)條件下,精密吸取沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液10μl,連續(xù)進(jìn)樣6次,峰面積的RSD=1.3% ,表明儀器精密度良好。
1.3.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn):取室溫下放置的樣品溶液,在20 h內(nèi)進(jìn)樣6次,其峰面積的RSD=2.4%,表明樣品溶液在室溫下20 h穩(wěn)定。
1.3.5 方法精密度(重復(fù)性)試驗(yàn):精密稱取沒(méi)食子藥材1 g,按“1.3.1”項(xiàng)下方法制備6份供試品溶液,分別測(cè)定沒(méi)食子酸的含量,RSD=3.8%,證明此方法精密度良好。
1.3.6 加樣回收率試驗(yàn):精密稱取已知含量的沒(méi)食子樣品細(xì)粉,分別加入沒(méi)食子酸對(duì)照品,按“1. 3.8”項(xiàng)下方法測(cè)定沒(méi)食子酸的含量,再計(jì)算回收率,結(jié)果見(jiàn)表1。
1.3.7 樣品的測(cè)定:精密稱取沒(méi)食子藥材1 g,按“1. 3.1”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,經(jīng)微孔濾膜(0.45μm)過(guò)濾,取續(xù)濾液l0 l進(jìn)樣,同時(shí)進(jìn)l0μl對(duì)照品溶液,進(jìn)樣5次,用峰面積按外標(biāo)法計(jì)算,得沒(méi)食子酸的平均含量31.65 mg/g,RSD=0.98%(n=5)。

2 討論
    沒(méi)食子中主要含有可水解的鞣質(zhì),加熱提取會(huì)水解成沒(méi)食子酸,因此,樣品選用超聲提取的方法。曾分別超聲0.5、1.0、1.5、2.0 h,結(jié)果顯示,1.0 h已經(jīng)提取*。文中方法用于沒(méi)食子中沒(méi)食子酸的含量測(cè)定,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果準(zhǔn)確。

參考文獻(xiàn):
【1】 劉起中,張可可.HPLC法測(cè)定五倍子中沒(méi)食子酸的含量[J]中草藥,2002,33(5):427
 

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